產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
革命性細菌DNA提取方式：一步法提取試劑盒
|
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
|
|
|
AE101 |
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒 |
50次 |
|
|
|
AE102 |
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒 |
100次 |
|
|
組分 |
存儲條件 |
50 preps，貨號#AE-101 |
100 preps，貨號#AE-102 |
|
|
BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
|
|
10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
|
|
Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
|
|
DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
|
|
Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
|
運輸和儲存：根據(jù)下表，在收到貨物時儲存各組分。
簡介
提取細菌DNA的標準流程可能非常耗時，屬于勞動密集型的特定應(yīng)用（如細菌基因分型），需要長時間的DNA提取過程。例如，傳統(tǒng)的細菌DNA提取需要用蛋白酶K裂解，然后進行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技術(shù)，例如二氧化硅結(jié)合和洗脫試劑盒，近些年已經(jīng)非常成熟。這些技術(shù)基于陽性色譜純化選擇。高濃度的鹽溶液（例如鹽酸胍）會將DNA與二氧化硅結(jié)合。核酸結(jié)合后，用鹽/乙醇溶液洗滌二氧化硅離心柱或磁珠，以清除樣品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脫緩沖液或水洗脫離心柱或磁珠以洗脫純化后DNA。這種結(jié)合-清洗-洗脫過程非常耗時，需要多次清洗和移液步驟。重復(fù)的移液步驟會導(dǎo)致相當大的DNA損失（20-40%）和丟失。此外，高鹽溶液和其他雜質(zhì)很容易殘留進洗脫的DNA或RNA中，損害最終的純度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
BcMag?一步法細菌DNA純化試劑盒，可以從微生物（如革蘭氏陽性或革蘭氏陰性細菌）中快速，無需離心柱提取基因組DNA。該試劑盒使用我們獨特的專有磁珠和緩沖液，可以有效裂解細胞，同時去除緩沖液中溶解的PCR抑制劑類雜質(zhì)，不影響DNA使用。該提取過程采用溫和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解條件下，如堿性裂解和使用有毒化學試劑時，對于裂解細胞核酸的損害，這樣就保持了DNA完整性和避免了從樣品中清除有機溶劑的耗時過程。此外，本產(chǎn)品中的磁珠在不用于提取DNA的情況下，也可在單個步驟中用于從樣品中清除PCR抑制劑（圖1）。使用本試劑盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸產(chǎn)量，并將傳統(tǒng)的DNA純化技術(shù)中耗時的“結(jié)合-洗滌-洗脫”過程造成的DNA損失降至最低。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到30分鐘的時間內(nèi)完成超過96個樣品的DNA純化。純化出的基因組DNA具有高度的完整性，可用于各種下游應(yīng)用，如qPCR、STR等。
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒工作流程
1. 使用鋼珠在打珠器中破碎樣品。
2. 離心并將上清液轉(zhuǎn)移到新試管中。
3. 將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細胞。
4. 渦旋磁珠以捕獲PCR抑制劑。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有純凈DNA的上清液。
應(yīng)用
純化的DNA可用于下游應(yīng)用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態(tài)性（SNP），短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）基因分型，基因分型，新一代測序（NGS，獸醫(yī)基因分型等）。
特點和優(yōu)勢：
l 快速高效的純化方案：無需液體轉(zhuǎn)移，只需一個試管，無需事先分離DNA，可直接用于放大實驗的工作流程。
l 節(jié)約時間成本：可在不到一小時內(nèi)處理96個樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價陽離子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性價比高：無需離心柱、過濾器、不用反復(fù)的重復(fù)移液和使用有機試劑。
l 可用于高通量實驗：與許多不同的全自動核酸提取系統(tǒng)兼容。
