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產(chǎn)品中心
Product Center

一步法RNA清除試劑盒

一步法RNA清除試劑盒

一步法RNA清除試劑盒

貨號

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

AU101

BcMag ? 一步法RNA除試劑盒

1ml


AU102

BcMag ? 一步法RNA除試劑盒

3ml


 

 

 

 

 

配方:液體成分(50 mM Tris-HClpH 8.0,50%甘油)

活性:1μl磁珠將在37°C下于15分鐘內(nèi)在50 mM Tris-HClpH 8.0)中,可將0.5μg酵母RNASigma,目錄號#R9001)降解。

裝運:在常溫環(huán)境下裝運。收到后,將核酸酶磁珠保存在-20°C。等分試樣以避免反復(fù)冷凍和解凍。


這種一步法RNA去除試劑盒為從樣品中快速去除RNA提供了一種方便可靠的方法。該試劑盒包括一種獨特的酶組合,可快速有效地降解RNA,用于各種下游應(yīng)用。

簡介

一步法RNA除試劑盒使用核糖核酸酶A固定化磁珠,僅需單步操作就可從樣品中有效去除RNARNase A是一種源自牛胰腺的核糖核酸酶它是一種分子量為13.7 kDa的單鏈多肽。RNase A可將核糖核酸(RNA)非表面降解為較小的成分。用RNase A固定的磁珠可以有效地從生物樣品中去除RNA,由于核酸酶穩(wěn)定且與磁珠共價綴合,因此溶液中不殘留核酸酶。

應(yīng)用程序

用于目標(biāo)分析

質(zhì)粒和基因組DNA制備

通過流式細(xì)胞術(shù)和碘化丙啶(PI)染色進(jìn)行細(xì)胞周期分析

從重組蛋白制劑中去除RNA

核糖核酸酶保護(hù)測定。與RNase T1結(jié)合使用

繪制DNARNA中的單堿基突變

特點和優(yōu)勢

高效的單管,需純化過程(圖1)。

l 快速:在30分鐘內(nèi)可以處理96個樣品,手動時間小于10

在反應(yīng)結(jié)束后,回收的核酸酶磁珠可以重復(fù)使用

易于從反應(yīng)中分離核酸酶磁珠

l 良好的核酸酶結(jié)合穩(wěn)定性

l 性價比高無需過濾柱、吸附管、操作簡單、不需要有機試劑,僅需少量的離心管。

l 適用于高通量實驗:與許多不同的自動化液體處理系統(tǒng)兼容。

工作流程圖

 

 

操作協(xié)議

A、 所需設(shè)備

A. 

Item

Source

離心管式磁力分離器

 

** 根據(jù)實驗時生物樣品的體積,使用者可以選擇一下不同型號的磁力分離器

· BcMag? separator-2可以容納兩個單獨的1.5 ml離心管(Cat.# MS-01);

· BcMag? separator-6可以容納六個單獨的1.5 ml離心管(Cat.# MS-02);

· BcMag? separator-24可以容納24個單獨的1.5-2.0 ml離心管(Cat.# MS-03);

· BcMag? separator-50可以容納一個單獨的50 ml離心管,一個15ml的離心管,以及四個1.5ml離心管(Cat.# MS-04);

BcMag 96孔磁力分離器.

· BcMag 96-孔磁力分離器(單面) 96PCR板和96孔微孔板或其他型號離心板兼容使用 (Blioclone,  Cat#: MS-06)

 

B、 實驗過程

· 不要使用含有有機溶劑的緩沖液。

通常,根據(jù)RNA的濃度,所需的磁珠直接添加到任何標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中。(1μl磁珠將消化10μg酵母RNA)。

1工作條件

條件

最優(yōu)條件

功能范圍

抑制作用

溫度

60

15–70°C

N/A

pH

7.6

6.0–10.0

N/A

Zn2+

 

 

是的

Cu2+

N/A

N/A

是的

0-100 mM NaCl

優(yōu)先切割單鏈和雙鏈RNA以及RNA-DNA雜種中的RNA鏈。

 

N/A

 

>300mmol氯化鈉

優(yōu)先切割單鏈RNA

 

 

鹽酸胍

N/A

N/A

4M+0.1M 2-巰基乙醇

十二烷基硫酸鈉

 

 

是的

 

1.震動試劑瓶,使磁珠重新懸浮,直至完全混勻。

提示:分液將磁珠混勻是非常重要的步驟,不要讓混勻的磁珠靜置超過兩分鐘,使用時每兩分鐘混勻一次磁珠

2.在反應(yīng)體系中加入適量的磁珠。

3.1-2分鐘內(nèi),移液器緩慢上下移液20-25次,將樣品與磁珠混合;或以2000 rpm

的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)樣品2分鐘。

4.37℃下連續(xù)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)15分鐘。

5.將樣品板或樣品管放在磁力分離器30秒或直到溶液澄清。(選項:以3500 rpm離心

45秒)

6.當(dāng)樣品板保持在力分離器時,將上清液轉(zhuǎn)移到干凈的板/管中,該樣本可用于下游

應(yīng)用。

 

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