產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法桑格測序純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
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AI101 |
BcMag ? 一步法測序純化試劑盒 |
1ml |
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AI102 |
BcMag ? 一步法測序純化試劑盒 |
5ml |
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收到產(chǎn)品后，在4°C下可保存6個月。
使用一步法桑格測序純化試劑盒，可消除污染物并簡化DNA測序過程。
導(dǎo)言
桑格測序，也稱為“鏈終止子測序”，是一種DNA測序方法，它依賴于DNA聚合酶在體外DNA復(fù)制過程中選擇性摻入熒光標(biāo)記的（bigdye終止子）雙脫氧核苷酸鏈終止子，用于單個測序反應(yīng)。鏈終止PCR產(chǎn)生不同長度的DNA片段，每個片段以熒光標(biāo)記的雙脫氧核苷為尾端。鏈終止PCR的功能類似于標(biāo)準(zhǔn)PCR，但有一個關(guān)鍵不同點(diǎn)。與常規(guī)PCR不同的是，經(jīng)過修飾的核苷酸的添加比例較低，且與正常dNTP一起加入反應(yīng)體系中，參與反應(yīng)。這些經(jīng)過修飾的dNTP被稱為雙脫氧核苷（ddNTP），并且其上連接有熒光染料作為熒光標(biāo)記。這種方法很快成為各種應(yīng)用中最常用的測序方法，包括從頭測序，突變發(fā)現(xiàn)及確認(rèn)，以及全基因組測序。
循環(huán)測序反應(yīng)后，有必要從DNA合成產(chǎn)物中去除雜質(zhì)（例如，未反應(yīng)的熒光染料，殘留的無機(jī)鹽，dNTP，引物和酶）。這些雜質(zhì)，例如染料峰或“染料斑點(diǎn)”，經(jīng)常會干擾測序數(shù)據(jù)的質(zhì)量和信號強(qiáng)度，造成測序色譜圖的部分模糊，并干擾測序分析工具的堿基檢出準(zhǔn)確性。為了純化測序反應(yīng)產(chǎn)物，目前市場上有許多染料終止劑去除（測序純化）產(chǎn)品可供選擇。但是，這些測序純化方案要么耗時（例如，使用離心柱，乙醇沉淀和SPRI超順磁珠），要么由于蛋白質(zhì)沉淀，幾個液體轉(zhuǎn)移操作和漫長的過程而導(dǎo)致樣品丟失。
BcMag ? 一步測序純化試劑盒使我們特殊設(shè)計的，用于快速有效地純化桑格測序反應(yīng)的產(chǎn)品。整個方案只需要一個試管，不到5分鐘就可完成實驗（圖1）。僅需將磁珠直接添加到完成的測序反應(yīng)液中，通過渦旋以捕獲雜質(zhì)（例如，未反應(yīng)的熒光染料，殘留的無機(jī)鹽，dNTP，引物和酶）。渦旋后，磁珠被磁力分離器捕獲，而干凈的上清液可以直接加載到毛細(xì)管測序儀上。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 一個試管，3分鐘過程，不會造成樣品流失
l 可靠的實驗結(jié)果：無論長片段還是短片段，Q20讀取長度> 800 bases
l 性價比高：可極大的減少實驗成本，及減少耗材的使用，如吸附柱，過濾器，酒精等，也不用重復(fù)的使用移液器抽吸。
l 高通量：可兼容多種不同的自動化液體處理系統(tǒng)
l 可與BigDye XT核酸運(yùn)行系統(tǒng)兼容，如不需要將磁珠從試管清除，上清液可以直接裝載到毛細(xì)管測序器上。
l 可以高效的去除任何染料
